Лабораторные методы диагностики СПИДа

Содержание
  1. Современные методы диагностики ВИЧ-инфекции
  2. Методики диагностики ВИЧ
  3. Ифа тест-системы
  4. Почему ИФА-тест может давать ложноположительные результаты?
  5. Иммунный блоттинг
  6. Полимеразная цепная реакция
  7. Экспресс-методы
  8. К какому врачу обратиться
  9. Диагностика ВИЧ
  10. Что это за вирус
  11. Как происходит заражение
  12. По каким признакам заподозрить ВИЧ
  13. Способы диагностики
  14. ИФА-системы
  15. Почему ИФА может быть ложной
  16. Иммуноблоттинг
  17. Пцр в помощь
  18. Экспресс-системы для диагностики
  19. К какому врачу обратиться при подозрении на заражение
  20. Способы диагностики ВИЧ-инфекции
  21. СПИД диагностика: скрининговый анализ
  22. ИФА – стандартный метод диагностики ВИЧ инфекции: как осуществляется, почему дает ложный результат?
  23. Основные методы лабораторной диагностики ВИЧ инфекции: иммунный блоттинг
  24. Другие методы диагностики СПИДа и ВИЧ
  25. Диагностика ВИЧ-инфекции: серологический метод и его особенности
  26. Референс-диагностика ВИЧ-инфекции: описание и особенности
  27. Интересные материалы по этой теме!
  28. Методы диагностики ВИЧ инфекции
  29. Расшифровка данных
  30. Проведение иммунного блоттинга
  31. Быстрые методики исследования

Современные методы диагностики ВИЧ-инфекции

Лабораторные методы диагностики СПИДа

Своевременная диагностика ВИЧ-инфекции становится крайне важной мерой, т. к. ранее начало лечения может во многом предопределить дальнейшее развитие заболевания и продлить жизнь больного СПИДом.

В последние годы наблюдается весомый прогресс в области выявления этой страшной болезни: на смену старым тест-системам приходят более совершенные, методы обследования становятся более доступными, и их точность значительно повышается.

В данной статье расскажем о современных методах диагностики ВИЧ-инфекции, знать которые полезно для своевременного лечения данной проблемы и поддержания нормального качества жизни заболевшего.

Методики диагностики ВИЧ

В России для диагностики ВИЧ-инфекции проводится стандартная процедура, включающая в себя два уровня:

  • ИФА тест- система (скрининговый анализ);
  • иммунный блоттинг (ИБ).

Также для диагностики могут применяться другие методики:

Ифа тест-системы

На первом этапе диагностики для выявления ВИЧ-инфекции применяется скрининговый тест (ИФА), который основан на созданных в лабораториях белках ВИЧ, улавливающих вырабатывающиеся в организме в ответ на инфицирование специфические антитела. После их взаимодействия с реагентами (ферментами) тест-системы изменяется окраска индикатора. Далее эти изменения цвета обрабатываются на специальной аппаратуре, которая и определяет результат выполненного анализа.

Такие ИФА-тесты способны показывать результат уже через несколько недель после внедрения ВИЧ-инфекции. Этот анализ определяет не наличие вируса, а выявляет выработку антител к нему. Иногда, в организме человека выработка антител к ВИЧ начинается через 2 недели поле заражения, но у большинства людей они вырабатываются на более поздних сроках, спустя 3-6 недель.

Существует четыре поколения ИФА-тестов с различной чувствительностью. В последние годы чаще применяются тест-системы III и IV поколения, которые созданы на основе синтетических пептидов или рекомбинантных белков и обладают большей специфичностью и точностью.

Они могут использоваться для диагностики ВИЧ-инфекции, мониторинга распространенности ВИЧ и обеспечения безопасности при проверке донорской крови.

Точность ИФА-тест-систем III и IV поколения составляет 93-99% (более чувствительны тесты, которые выпускаются в странах западной Европы – 99%).

Для выполнения ИФА-теста проводится забор 5 мл крови из вены пациента. Между последним приемом пищи и анализом должно пройти не менее 8 часов (как правило, он выполняется утром натощак). Такой тест рекомендуется сдавать не ранее, чем через 3 недели после предполагаемого заражения (например, после незащищенного полового акта с новым половым партнером).

Результаты ИФА-теста получаются через 2-10 дней:

  • отрицательный результат: указывает на отсутствие инфицирования ВИЧ и не требует обращения к специалисту;
  • ложноотрицательный результат: может наблюдаться на ранних сроках инфицирования (до 3 недель), при поздних стадиях СПИДа при выраженном подавлении иммунитета и при неправильно проведенной подготовке крови;
  • ложноположительный результат: может наблюдаться при некоторых заболеваниях и при неправильно проведенной подготовке крови;
  • положительный результат: указывает на заражение ВИЧ инфекцией, требует проведения ИБ и обращения пациента к специалисту в центр СПИДа.

Почему ИФА-тест может давать ложноположительные результаты?

Ложноположительные результаты ИФА-теста на ВИЧ могут наблюдаться при неправильной обработке крови или у больных с такими состояниями и заболеваниями:

  • множественная миелома;
  • алкогольный гепатит;
  • инфекционные заболевания, спровоцированные вирусом Эпштейна-Барр;
  • состояние после диализа;
  • аутоиммунные заболевания;
  • на фоне беременности;
  • состояние после вакцинации.

При вышеописанных причинах в крови могут присутствовать неспецифические перекрестно реагирующие антитела, выработка которых была спровоцирована не ВИЧ-инфекцией.

В последние годы частота ложноположительных результатов существенно снизилась благодаря применению тест-систем III и IV поколения, которые содержат более чувствительные пептидные и рекомбинантные белки (они синтезируются при помощи генной инженерии in vitro). После начала применения таких ИФА-тестов частота ложноположительных результатов значительно снизилась и составляет около 0,02-0,5%.

Выявление ложноположительного результата не означает, что человек инфицирован ВИЧ. В таких случаях ВОЗ рекомендует провести еще один ИФА-тест (обязательно IV поколения).

Кровь пациента отправляется в референс или арбитражную лабораторию с пометкой «повторить» и исследуется на ИФА тест-системе IV поколения.

Если результат нового анализа отрицательный, то первый результат признается ошибочным (ложноположительным) и ИБ не проводится.

При положительном или сомнительном результате во время второго теста больному обязательно назначается проведение ИБ через 4-6 недель для подтверждения или опровержения ВИЧ-инфицирования.

Иммунный блоттинг

Окончательный диагноз инфицирования ВИЧ может устанавливаться только после получения положительного результата иммунного блоттинга (ИБ). Для его проведения применяется нитроцеллюлозная полоска, на которую нанесены вирусные белки.

Забор крови для ИБ выполняется из вены. Далее она подвергается специальной обработке и содержащиеся в ее сыворотке белки разделяют в специальном геле по их заряду и молекулярной массе (манипуляция проводится на специальной аппаратуре под воздействием электрического поля).

На гель из сыворотки крови накладывают нитроцеллюлозную полоску и проводят блоттинг («промакивание») в специальной камере. Полоска обрабатывается и если в используемых материалах есть антитела к ВИЧ, то они связываются с антигенными полосами на ИБ и проявляются в виде линий.

ИБ считается положительным если:

  • по критериям American CDC – на полоске есть две или три линии gp41, p24, gp120/gp160;
  • по критериям American FDA – на полоске есть две линии р24, р31 и линия gр41 или gр120/gр160.

В 99,9% случаев положительный результат ИБ указывает на ВИЧ-инфицирование.

При отсутствии линий – ИБ является отрицательным.

При выявлении линий с gр160, gр120 и gр41- ИБ является сомнительным. Такой результат может выявляться при:

В таких случаях рекомендуется выполнение повторного исследования при помощи набора другой фирмы. Если же после дополнительного ИБ результат остается сомнительным, то необходимо наблюдение в течение полугода (через каждые 3 месяца проводятся ИБ).

Полимеразная цепная реакция

Тест на ПЦР может определять РНК вируса. Его чувствительность достаточно высока и он позволяет выявлять ВИЧ-инфицирование уже через 10 дней после заражения. В некоторых случаях ПЦР может давать ложноположительные результаты, т. к. его высокая чувствительность может реагировать и на антитела к другим инфекциям.

Данная методика диагностики является дорогостоящей, требует специального оборудования и высокой квалификации специалистов. Эти причины не дают возможности проводить ее при массовом тестировании населения.

ПЦР применяется в таких случаях:

  • для выявления ВИЧ у новорожденных, которые родились от ВИЧ-инфицированных матерей;
  • для выявления ВИЧ в «периоде окна» или при сомнительном ИБ;
  • для контроля концентрации ВИЧ в крови;
  • для исследования донорской крови.

Только по тесту ПЦР диагноз ВИЧ не ставится, а проводится в качестве дополнительного метода диагностики для разрешения спорных ситуаций.

Экспресс-методы

Одной из инноваций в диагностике ВИЧ стали экспресс-тесты, результаты которых могут оцениваться уже через 10-15 минут. Наиболее эффективные и точные результаты получаются при помощи иммунохроматографических тестах, основанных на принципе капиллярного потока.

Они представляют собой специальные полоски, на которые наносится кровь или другие исследуемые жидкости (слюна, моча). При наличии антител к ВИЧ спустя 10-15 минут на тесте появляются цветная и контрольная полоска – положительный результат.

При отрицательном результате – появляется только контрольная полоска.

Как и после тестов ИФА, результаты экспресс-тестов должны подтверждаться анализом ИБ. Только после этого может ставиться диагноз о ВИЧ-инфицировании.

Существуют экспресс-наборы для домашнего тестирования. Тест OraSure Technologies1 (США) одобрен FDA, продается без рецепта и может применяться для выявления ВИЧ. После проведения теста, в случае положительного результата, больному рекомендуется пройти обследование в специализированном центре для подтверждения диагноза.

Остальные тесты для домашнего использования еще не были одобрены FDA и их результат может быть очень сомнительным.

Несмотря на то, что экспресс-тесты по своей точности уступают ИФА-тестам IV поколения, они широко применяются для дополнительного тестирования населения.

Сдать анализы на выявление ВИЧ-инфекции можно в любой поликлинике, ЦРБ или в специализированных СПИД-центрах. На территории России они проводятся абсолютно конфиденциально, или анонимно.

Каждый пациент может рассчитывать на получение медицинской или психологической консультации до или после проведения анализа.

Платить за тесты на ВИЧ придется только в коммерческих лечебных учреждениях, а в государственных поликлиниках и больницах они выполняются бесплатно.

О том, какими путями можно заразиться ВИЧ-инфекцией и какие мифы существуют о возможностях заразиться, читайте в этой статье.

К какому врачу обратиться

Чтобы обследоваться на ВИЧ-инфекцию, нужно посетить терапевта и взять у него направление на анализ. Кроме того, можно прийти непосредственно в Центр профилактики и борьбы со СПИДом и сдать анализы там анонимно. Направляет на это обследование и врач-инфекционист или венеролог при подозрении на ВИЧ-инфекцию.

Оценка статьи: ( 5,00) Загрузка…

Источник: https://myfamilydoctor.ru/sovremennye-metody-diagnostiki-vich-infekcii/

Диагностика ВИЧ

Лабораторные методы диагностики СПИДа

Диагностика ВИЧ– одна из первостепенных задач, что стоят перед работниками кожно-венерологического диспансера, а также сотрудниками поликлиники.

Заболевание характеризуется врачами, как очень коварное. Характеризуется хроническим течением и не поддается полноценному лечению. Его важно своевременно выявлять, чтобы брать под контроль и предотвращать бесконтрольное распространение. В чем особенности вируса иммунодефицита человека, и как им можно заразиться, часто интересуются пациенты.

Какие есть способы диагностики болезни, и какие признаки позволяют заподозрить инфицирование?

Что это за вирус

Сегодня отовсюду можно услышать о том, насколько опасна ВИЧ-инфекция. Однако мало кто объясняет, в чем эта опасность заключается.

В результате пациенты обладают неполным набором информации и, как следствие, не воспринимают угрозу всерьез. А ведь ВИЧ отличается крайней опасностью.

Его относят к медленно прогрессирующим вирусным заболеваниям, склонным к хроническому течению. Поражается при этой патологии в первую очередь иммунная система.

Врачи обращают внимание пациентов на то, что смерть происходит не от самого вируса иммунодефицита, как такового.

Человек погибает от сопутствующих инфекций, обеспечить полноценную защиту от которых организм уже не способен. Также причиной гибели становятся раковые опухоли, с которыми оказывается не в состоянии бороться сниженный иммунитет.

На самом деле механизм воздействия ВИЧ-инфекции на иммунную систему довольно сложен. Как отмечают доктора, пациентам вовсе не обязательно понимать его досконально. Достаточно знать, что заболевание способно снижать уровень иммунитета до критических значений. В результате организм окажется неспособен защищаться от различных воздействий извне, что приведет к гибели рано или поздно.

Как происходит заражение

Важно понимать, что ВИЧ-инфекция сегодня окружена большим количеством самых разнообразных мифов.

Пациенты очень плохо информированы о том, в каких случаях можно заразиться, а когда здоровье находится вне опасности.

Первое, что необходимо запомнить, это то, что ВИЧ отличается очень сильной неустойчивостью в окружающей среде. Это значит, что патогенный микроорганизм способен полноценно и длительно жить только в человеческом теле.

Он не переносит нагревания свыше 50 градусов (умирает мгновенно). Также не способен противостоять процессам высыхания.

Далеко не все жидкости организма содержат достаточное количество вируса для того, чтобы произошло заражение.

Наибольшую опасность представляют:

  • кровь;
  • предэякулят;
  • сперма;
  • выделения из женского влагалища;
  • лимфа;
  • грудное молоко.

Если любая из этих жидкостей контактирует со слизистыми оболочками, в которых есть микротравмы, или с пораженной травмами кожей, происходит заражение.

Также оно возможно в том случае, если инородная жидкость попадает напрямую в кровоток. Слюна и слезы, вопреки распространенному мнению, угрозы не представляют. Из-за особенностей вируса и его низкой выживаемости передается он несколькими способами:

  • половой путь т.е. при незащищенных половых контактах, которые неминуемо влекут за собой соприкосновение биологических жидкостей и восприимчивых к патогену слизистых оболочек организма;
  • парентеральный путь т.е. перенос вируса с кровью при ее переливании или из-за использования нестерильного инструментария в медицинских целях;
  • вертикальный путь т.е. от матери к ребенку (сегодня если женщина принимает антиретровирусную терапию и отказывается от кормления грудью, вероятность заражения ребенка в родах сводится к минимуму).

Важно понимать, что если для заражения через кожу микротравмы или открытые раны обязательны, то для заражения через слизистую это не обязательно условие. Объясняется разница тем, что слизистые оболочки и кожные покровы человеческого организма имеют совершенно разное строение. Эту разницу необходимо учитывать.

По каким признакам заподозрить ВИЧ

Многие пациенты интересуются вопросом о том, по каким признакам обычно можно заподозрить заражение вирусом иммунодефицита человека.

Врачи рекомендуют обращаться для диагностики в СПИД-центры или поликлиники по месту жительства, если человек замечает у себя следующие симптомы:

  • необоснованное повышение температуры системного типа, которое нельзя объяснить какой-либо другой инфекцией, и которое сохраняется в течение длительного времени, несмотря на предпринимаемые для лечения меры;
  • сильное увеличение лимфатических узлов в размерах (в первую очередь страдают узлы в области паха, но возможно и их вовлечение во всем организме);

Читать также  Анализ на ВПЧ

  • сильное снижение массы тела, которое нельзя объяснить диетами, стрессами, гормональными сбоями и другими причинами;
  • жалобы на расстройства стула, которые преследуют пациента в течение длительного времени, а найти причину, по которой они появились, не удается;
  • выраженная склонность к переходу любых инфекционных заболеваний в хронические формы, причем природа возбудителя особого значения не имеет, хронизируются как бактериальные, так и вирусные патологии;
  • развиваются заболевания, провоцируемые условно-патогенной микрофлорой, которая не представляет угрозы для человека, чей иммунитет работает в полной мере (например, микоплазмоз, уреаплазмоз, кандидоз и др.).

Клиника ВИЧ-инфекции очень неспецифична, как отмечают доктора. Из-за этого часто возникают трудности с постановкой диагноза. Многие пациенты вовсе игнорируют тревожные симптомы, предпочитая не обращаться за врачебной помощью. Даже в том случае, если заболевание сильно сказывается на их общем самочувствии.

Важно понимать, что ВИЧ-инфекция в течение длительного времени может вообще не давать о себе знать. А когда первые признаки появятся, человек может даже не связать их с возможностью своего заражения и делать попытки лечиться в домашних условиях.

Способы диагностики

Лабораторная диагностика ВИЧ разработана довольно давно и с успехом применяется для того, чтобы диагностировать это опасное заболевание.

Недуг нельзя опознать только по симптомам. Поэтому подтверждение диагноза на основании лабораторных методик часто играет решающую роль.

Существуют различные методы диагностики ВИЧ. В России в первую очередь предпочтение отдается иммунному блоттингу, а также ИФА-реакциям. Эти способы используются часто в качестве скрининговых, например, при проверке медицинского персонала.

ИФА-системы

Часто пациенты спрашивают у своих врачей, с какого способа стоит начать диагностический поиск при подозрении на заражение вирусом иммунодефицита человека.

Любой грамотный доктор скажет, что предпочтение стоит отдать иммуноферментному анализу. Именно эта методика на территории России является первым диагностическим этапом.

Принцип работы ИФА прост. В лаборатории врачами были созданы специальные белки. Они способны обнаруживать антитела, вырабатываемые организмом в ответ на контакт с ВИЧ, и взаимодействовать с ними. Затем к системе добавляют специальный фермент-индикатор, который изменяет свой цвет. На конечном этапе материал обрабатывается с помощью специального аппарата, и врач получает итоговый результат.

ИФА пользуется большой популярностью.

Прежде всего из-за того, что получить результаты можно даже в том случае, если с момента внедрения патогенна в организм прошло не более нескольких недель.

Важно понимать, что иммуноферментный анализ определяет не сам вирус в крови, а антитела к нему.

У многих людей они могут начать вырабатываться позже, чем через две недели, из-за чего результат может быть ошибочным. Существует несколько поколений ИФА-тестов.

Самыми современными и высокоточными считаются те, что относятся к 3 и 4 поколениям. Врачи отмечают, что лучше всего, если есть выбор, отдавать предпочтение Европейским реагентам, так как их точность достигает 99%. Сроки получения результатов ИФА составляют в среднем от 2 до 10 дней.

Почему ИФА может быть ложной

Важно понимать, что иммуноферментный анализ может давать как ложноположительные, так и ложноотрицательные результаты. Хотя риск подобного развития событий крайне мал.

Ложноотрицательные результаты пациент может получить в том случае, если анализ был сдан слишком рано, и антитела еще не успели образоваться в организме.

Чтобы исключить подобную реакцию, пациентам рекомендуется сдавать анализ несколько раз с различным промежутком времени.

Ложноположительный тест встречается при некоторых заболеваниях. Например, получить положительные результаты могут пациенты с:

  • алкогольным гепатитом;
  • миеломами в большом количестве;
  • некоторыми аутоиммунными болезнями;
  • женщины в период беременности и др.

При подобных заболеваниях кровь человека пополняется антителами. Они могут напоминать по структуре антитела к ВИЧ, что вводит реагенты в замешательство, провоцируя реакцию. Конечно, в последние годы тестовые системы становятся все более и более чувствительными. Однако пока до конца решить проблему ложных результатов не удалось.

Иммуноблоттинг

В современных условиях поставить положительный диагноз ВИЧ, опираясь только на ИФА, нельзя. Необходимо подтверждение полученных результатов, которое выполняется с помощью реакции иммунного блоттинга (иммуноблоттинг, ИБ).

Чтобы выполнить ИБ, в лаборатории должны присутствовать специальные тестовые полоски. На них наносятся вирусные белки. Перед тем, как проводить анализ, кровь пациента, взятую из вены, подготавливают специальным образом.

Читать также  Характеристика основных возбудителей венерических заболеваний

Полученный биологический материал добавляют в гель, в котором происходит разделение белков по их весу. Затем в полученную массу опускают предварительно заготовленную полосу.

Полоса намокает (происходит блоттинг), на ней выявляются полосы, если в материале есть белки ВИЧ-инфекции. Если белки отсутствуют, намокание не изменяет внешний вид полосы.

Существует несколько трактовок иммуноблоттинга. Однако по какому бы способу конкретная больница или лаборатория не выполняла расшифровку, вероятность правильности постановки диагноза составляет 99,9%.

Может ли иммуноблоттинг давать неверные результаты, часто интересуются пациенты? Да, это возможно, например, если пациент болен туберкулезом, находится в состоянии беременности, страдает от онкологии.

Врачам, назначающим иммуноблоттинг, рекомендуется учитывать ассоциированные состояния, которые могут дать ложноположительные результаты.

Пцр в помощь

ПЦР – еще один метод, который может диагностировать вирус иммунодефицита человека в крови и других биологических жидкостях, где его концентрация достаточно высока.

Как отмечают доктора, полимеразная цепная реакция может дать положительный результат уже через 10 дней после того, как произошел первый контакт организма с инфекцией.

Важно понимать, что ПЦР в ряде случаев дает ложноположительные результаты. Объясняется это тем, что метод обладает очень высокой чувствительностью.

В результате нередко он реагирует на похожие антитела, свидетельствующие о совсем других патологических процессах в организме пациента.

Несмотря на высокую чувствительность и невысокую вероятность получения ложных результатов, ПЦР не используется повсеместно. Объясняется это несколькими факторами.

Во-первых, для выполнения полимеразной цепной реакции требуется специальное оборудование, цена на которое довольно велика. Во-вторых, персонал, работающий с оборудованием, должен обладать высокой квалификацией, что тоже может вызывать затруднения.

Эти особенности в комплексе делают ПЦР дорогим методом диагностики и, как следствие, доступным далеко не всем.

Несмотря на то, что ПЦР не является скрининговым методом, его применяют, например, для проверки новорожденного на заражение вирусом иммунодефицита человека.

Экспресс-системы для диагностики

Врачи и ученые потратили множество усилий на то, чтобы создать экспресс-тесты для оценки зараженности ВИЧ-инфекцией. Как отмечают доктора, при использовании этих систем есть возможность получить результат уже через 15 минут после того, как тест был проведен.

Экспресс-тесты на ВИЧ строятся на принципе иммунохроматографии. В систему обычно входит полоска, пропитанная специальными реагентами.

Задача пациента состоит в том, чтобы нанести на нее кровь, сперму или любую другую биологическую жидкость, в которой могут содержаться антитела к вирусу.

Если они обнаружатся, то на полоске появятся две цветные полосы, одна из которых контрольная, а другая диагностическая. Если не обнаружатся, то выявится только контрольная полоса.

Важно понимать, что экспресс-тесты не дают 100% гарантии того, что человек не заражен или, напротив, заражен ВИЧ-инфекцией. В любом случае результаты, полученные с их помощью, необходимо подтверждать в лаборатории с помощью иммуноблоттинга.

Тест-системы экспресс типа удобны пациентам, которые хотят в домашних условиях успокоить себя. Однако, как отмечают доктора, даже если с их помощью человек получил отрицательный результат, при подозрениях на негативные изменения в организме все же стоит обратиться к врачу.

К какому врачу обратиться при подозрении на заражение

Многие пациенты задаются вопросом о том, к какому врачу им обращаться в том случае, если есть подозрение на заражение ВИЧ-инфекцией. В первую очередь рекомендуется посетить врача венеролога. Именно этот медицинский работник специализируются на заболеваниях, которые способны передаваться от человека к человеку половым путем.

Венеролог сможет провести грамотный осмотр, собрать анамнез и принять решение о том, какие обследования необходимы пациенту для точной постановки диагноза. По своему усмотрению он также может направить пациента в инфекционную больницу. Особенно в том случае, если все же подозревает у него ВИЧ.

Вирус иммунодефицита человека – распространенное заболевание. Столкнуться с ним может любой человек, ведущий активную половую жизнь.

Знание особенностей распространения и диагностики этой болезни в современных реалиях является жизненно-необходимым, если пациент хочет сохранить свое здоровье и долголетие. Только своевременное обращение к доктору позволит взять инфекцию под контроль и защититься от нее!

Источник: http://intimnyjotvet.ru/diagnostika/diagnostika-vich.html

Способы диагностики ВИЧ-инфекции

Лабораторные методы диагностики СПИДа
: 06 июн 2016, 17:33

Диагностика ВИЧ производится несколькими разными методами. Казалось бы, ничего проще, чем выявить это заболевание посредством забора крови, нет. Но это не совсем так.

Диагноз ВИЧ действительно можно выявить таким образом, но дальнейшее исследование производится разными методами. От них во многом зависит, какое лечение будет прописано пациенту, и какие меры будут приняты впоследствии.

  Среди самых распространенных и высокоэффективных методов принято выделять скрининговый анализ и иммунный блоттинг. Каждый из них следует рассмотреть более подробно.

СПИД диагностика: скрининговый анализ

Скрининговый анализ или метод исследования ИФА применяется на начальном этапе диагностики ВИЧ-инфекции. При разработке этого способа в лабораторных условиях искусственно создавались белки вируса. Они особым образом реагируют на антитела.

Последние вырабатываются в организме при появлении в нем клеток, зараженных страшным недугом. Лабораторная диагностика ВИЧ в этом случае производится при помощи искусственных ферментов. Вступая во взаимодействие с антителами, они окрашиваются в определенный цвет.

Полоска с индикатором после попадания на нее крови, помещается под специальный аппарат, с помощью которого удается определить, имеется ли у человека данное заболевание или нет.  Современные методы диагностики ВИЧ,  в том числе и ИФА позволяют определить  факт заражения или его отсутствия с высокой точностью.

Но, как и вся техника, аппарат для скринингового анализа имеет погрешность. Именно поэтому при необходимости анализ пересдается пациентом.

Важно знать, что ИФА тест – один из самых ранних методов определения наличия в организме вируса иммунодефицита. ВИЧ-инфекция – диагноз, который возможно выявить только через несколько недель после заражения. При попадании инфицированных клеток в кровь, иммунная система организма начинает активно сопротивляться.

Происходит выработка антител, которые обнаруживаются методом лабораторного исследования спустя две или три недели. Ранняя диагностика ВИЧ-инфекции посредством ИФА теста позволяет выявить антитела к вирусу иммунодефицита в крови человека. В этом заключается ее основное отличие от других современных методов.

 

Стоит отметить, что у некоторых людей антитела к данному заболеванию начинают вырабатываться на более поздних сроках.  С момента заражения до начала данного процесса может пройти от трех до шести недель.

Именно поэтому специалисты в области медицины рекомендуют проходить скрининговый анализ спустя четыре – пять недель после незащищенного полового контакта или другой причины, по которой можно подозревать факт случайного заражения.

Методы лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции ИФА разрабатывались на протяжении длительного времени. На сегодняшний день существует четыре поколения тестов. Наиболее точными и эффективными из них считаются те, что были разработаны последними.

Лабораторная диагностика ВИЧ-инфекции и СПИДа при использовании третьего и четвертого поколения ИФА тестов осуществляется при помощи рекомбинантных белков и пептидов. Чувствительность этих тестов к антителам, вырабатываемым организмом, составляет 92 – 93%. Речь идет о российских методах исследования.

Европейцы научились делать подобные тесты с чувствительностью от 99%.

Современные методы лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции на основе ИФА используются не только для того, чтобы выявить наличие заболевания. С помощью скринингового анализа возможно проводить мониторинг распространения вируса иммунодефицита, а также забор тестового материала перед осуществлением взятия крови у доноров.

ИФА – стандартный метод диагностики ВИЧ инфекции: как осуществляется, почему дает ложный результат?

Диагностика ВИЧ и СПИД посредством ИФА – стандартная процедура. Забор крови у пациента производится из вены. Для анализа достаточно пяти миллилитров материала. Клиническая диагностика ВИЧ 2 и 1 типа производится минимум через восемь часов после приема пищи. Врачи рекомендуют проводить ее утром натощак.

Результаты полного исследования бывают известны через два или три дня. Экспресс скрининг производится за меньшее время. Как правило, на это уходит всего несколько часов. Однако погрешность в этом случае увеличивается. Экспресс постановка диагноза ВИЧ необходима в экстренных случаях, например, когда больному нужна срочная операция.

Такой анализ обязательно производится перед внеплановыми хирургическими вмешательствами, ведь при наличии у пациента вируса иммунодефицита, медики соблюдают повышенные меры безопасности.

Клиническая диагностика ВИЧ-инфекции в короткий промежуток времени необходима и в том случае, когда забор донорской крови должен быть произведен быстро для спасения другого пациента.

Бывают случаи, когда человеку поставили диагноз СПИДа или ВИЧ, а в результате он не подтвердился или наоборот. Почему так происходит в случае с ИФА тестом? Ложноотрицательный результат может быть по причине того, что кровь была подготовлена к исследованию ненадлежащим образом.

Иногда причиной этому становится неправильное выполнение ее забора. Ложноотрицательный результат при верификации диагностики ВИЧ-инфекции не подтверждается и в том случае, когда материалы для исследования были взяты слишком рано. Ведь после заражения должно было пройти не менее трех недель.

Существуют случаи, когда результат обнаружения вируса иммунодефицита оказывается ложноположительным. Это связано с общим состоянием иммунной и гормональной систем человеческого организма. В большинстве случаев у пациента наблюдаются заболевания, которые и являются следствием ложноположительного результата.

Речь идет об алкогольном гепатите, при котором печень вырабатывает особые ферменты, что может стать причиной неправильной формулировки диагноза ВИЧ. Беременность и некоторые аутоиммунные заболевания, наряду с множественной миеломой также могут стать причиной ложноположительного результата.

В этот перечень можно включить пациентов на диализе и лиц, которые незадолго до дифференциальной диагностики ВИЧ проходили вакцинацию.

Говоря о скрининговом анализе, важно отметить, что этот метод исследования требует подтверждения. Врачи, перед тем, как ставят диагноз ВИЧ на его основании, обязательно отправляют больного на иммунный блоттинг.

Основные методы лабораторной диагностики ВИЧ инфекции: иммунный блоттинг

СПИД,  диагностика и лечение которого тесно взаимосвязаны, выявляется сразу несколькими способами. Как уже говорилось выше, одного ИФА теста бывает недостаточно для того, чтобы окончательно определиться с диагнозом.

Дифференциальная диагностика ВИЧ-инфекции в этом случае дополняется иммунным блоттингом. В современной медицине его называют окончательным подтверждающим методом постановки диагноза. Для исследования в этом случае используются белки, содержащиеся в крови пациента.

Они разделяются в специальном геле, после чего у работников лаборатории появляется возможность изучить молекулярный состав крови.

Сроки диагностики ВИЧ при таком методе составляет от одного до трех дней. Для исследования из вены испытуемого берут кровь, которую помещают на тестер с гелем. Результат, который ставится под сомнение, может возникнуть при беременности, наличии онкологических процессов, туберкулезе.

Ложноотрицательная реакция на тест может возникнуть при неправильном проведении исследования и в случае, если оно проводилось слишком рано. С момента заражения должно пройти не менее трех недель. Ведь то, через какое время диагностируется ВИЧ, напрямую зависит от состояния иммунитета.

Другие методы диагностики СПИДа и ВИЧ

Методы лучевой диагностики при СПИДе используются, как правило, в терминальной или вторичной  стадиях. С их помощью удается установить изменения, которые происходят в организме из-за вторичных заболеваний или оппортунистических инфекций.

Биорезонансная диагностика ВИЧ, которую также называют нелинейным сканированием, для выявления вируса иммунодефицита используется в основном в частных клиниках. Официальная медицина считает такой метод недостаточно точным и эффективным. Возможно, усовершенствование нелинейной диагностики в будущем позволит выявлять этот страшный диагноз уже в инкубационном периоде.

Диагностика ВИЧ-инфекции: серологический метод и его особенности

Это сравнительно новая методика, при которой лабораторные критерии диагностики ВИЧ-инфекции основываются на принципе антиген-антитело. В случае с вирусом иммунодефицита происходит поиск антител к вирусу в организме человека.

Для этого используется искусственным образом выведенный антиген, на который должны отреагировать антитела. Специфические серологические маркеры ВИЧ-инфекции вызывают специфические изменения в составе крови. Стоит отметить, что данный метод исследования наиболее эффективен в острой стадии, которая заканчивается сероконверсией.

За ней следует бессимптомный латентный период, во время которого найти антиген бывает не просто.

Референс-диагностика ВИЧ-инфекции: описание и особенности

ВИЧ-референсные значения считаются наиболее точными в выявлении диагноза. Данный метод исследования объединяет ИФА тест и иммунный блоттинг. Референс-лаборатория диагностики ВИЧ позволяет осуществить забор анализов и последующую их обработку сразу двумя способами.

Это позволяет в течение суток получить максимально точный результат. Перепроверка анализа, полученного в референс-лаборатории необходима лишь в том случае, если данные ИФА теста и иммунного блоттинга противоречат друг другу.

Это достаточно редкое явление, которое чаще всего бывает  у людей с вышеописанными сопутствующими заболеваниями. 

загрузка…

загрузка…

загрузка…

Интересные материалы по этой теме!

06 июн 2016, 14:02Где лечить ВИЧ, СПИД?
Где лечить ВИЧ? Вопрос, который возникает у многих пациентов, после…

загрузка…

загрузка…

загрузка…

загрузка…

Виталий –  02 июл 2018, 17:30

Значит мне необходимо делать тест на ВИЧ ИФА. Мне сказали сразу ПЦР делать и не задумываться.

Максим –  25 апр 2018, 16:33

Да, можно. Анализ делают в районной поликлинике.

Влад –  06 фев 2018, 12:48

Можно ли скрининговый анализ сделать бесплатно? Где лучше всего его делать?

Николай –  16 авг 2017, 15:27

Сколько нужно сдавать кровь, чтоб был точный результат?

Валерия –  10 фев 2017, 12:00

Иммунный блотинг может достоверно показать наличие ВИЧ-инфекции.

Источник: http://www.zppp.saharniy-diabet.com/vich-spid-1/diagnostika-2

Методы диагностики ВИЧ инфекции

Лабораторные методы диагностики СПИДа

Диагностика ВИЧ инфекции необходима для назначения эффективного лечения. Чтобы диагностировать СПИД, проводится стандартная процедура обследования пациента. Она состоит из 2 этапов:

  • сдача скрининга;
  • иммунный блоттинг.

Для постановки диагноза дополнительно назначают ПЦР, экспресс-тестирование.

Начальная диагностика СПИДа основана на применении лабораторных белков ВИЧ, которые улавливают специфические антитела. После их контакта с ферментами тест-системы изменяется цвет индикатора. Затем измененная цветовая гамма обрабатывается с помощью специальной аппаратуры, которая определяет результат тестирования.

Подобная лабораторная диагностика ВИЧ-инфекции показывает результат через 21 день после инфицирования. С помощью ИФА нельзя определить наличие вируса. Данный метод диагностики способствует выявлению выработки антител к вирусу. Подобный процесс может наблюдаться через 2-6 недель после заражения.

Специалисты различают 4 поколения ИФА-систем с разной чувствительностью. Медики чаще применяют тесты 3 и 4 поколения. Эти системы созданы на основе рекомбинантных белков либо пептидов синтетического происхождения, которые обладают значительной точностью и специфичностью.

ИФА применяется для выявления, мониторинга распространения вируса, что обеспечивает безопасность при проверке донорской крови. Точность таких систем колеблется в пределах 93-99%. Большей чувствительностью обладают тесты, выпущенные в Западной Европе. Чтобы выполнить диагностику, лаборант производит забор венозной крови (5 мл).

За 8 часов перед исследованием рекомендуется отказаться от принятия пищи. Исследование чаще проводится утром.

Расшифровка данных

Для получения результатов теста потребуется 10 дней. Если результат отрицательный, то пациент не инфицирован. В таком случае лечение не назначается. Ложноотрицательный результат выявляется:

  • до 3 недель после инфицирования;
  • на последней стадии СПИДа при низкой иммунной системе;
  • при неправильной подготовке крови.

Если результат положительный, тогда пациент инфицирован. В таком случае проводят ИБ. Ложноположительный результат указывает на наличие сопутствующих заболеваний и неправильно проведенную подготовку крови.

Если тестирование показано беременным, то в собранном материале врач может выявить неспецифические антитела, выработка которых не связана с вирусом. Собранный материал исследуется в референсе либо арбитражной лаборатории.

Если результат повторного тестирования отрицательный, тогда первый результат — ошибочный. В таком случае ИБ не проводится.

Проведение иммунного блоттинга

Лечение СПИДа назначается при получении положительного результата иммунного блоттинга. Этот метод диагностики проводится с помощью нитроцеллюлозной полоски, на которую наносятся вирусные белки.

Для ИБ используют венозную кровь, которая затем подвергается обработке. Белки, находящиеся в сыворотке, разделяются на группы с учетом их заряда и молекулярной массы.

Для проведения такого процесса используется специальная аппаратура.

При наличии в исследуемом материале антител к вирусу, на полоске проявляются соответствующие линии. Положительное ИБ указывает на ВИЧ-инфицирование пациента. Сомнительный результат выявляется на начальных этапах заражения, при туберкулезе и онкологии, у беременных. В таких случаях рекомендуется повторное проведение ИБ.

Неопределенный результат ИБ указывает на наличие в иммуноблоте одного и более белков к вирусу. Подобная картина наблюдается при недавнем заражении, когда в крови находится незначительное количество антител к инфекции.

В таком случае ИБ будет положительным через некоторое время. Неопределенный результат данного исследования может быть связан с отсутствием ВИЧ-инфекции при гепатитах, хронических обменных заболеваниях, в период беременности.

В таком случае ИБ станет отрицательным или специалисты выявят у пациента причину неопределенного результата.

Защитная система поражается на фоне внедрения вируса в человеческий организм. Для инкубационного периода характерен срок в 3 месяца. Поэтому после полового контакта с ВИЧ-инфицированным партнером рекомендуется пройти ПЦР-диагностику. Она позволит определить РНК вируса. Период, в течение которого рекомендуется пройти подобное исследование, составляет 8-24 месяца.

Для окончательного диагноза показана регулярная сдача крови на ВИЧ (1 раз в 3 месяца). За счет высокой чувствительности данное обследование позволяет выявить вирус через 10 дней после инфицирования.

Ложноположительный результат при ПЦР можно получить и при наличии в организме пациента другой инфекции.

ПЦР исследование считается дорогостоящей процедурой, так как требует наличия специального оборудования.

ПЦР назначается для выявления вируса у следующих лиц:

  • новорожденный, родившийся от ВИЧ-инфицированного матери;
  • пациенты с сомнительным ИБ.

Также данная методика показана для контроля концентрации вируса в крови и исследования донорской крови.

Быстрые методики исследования

К современным методам диагностики СПИДа специалисты относят экспресс-тесты. Для их расшифровки потребуется 10-15 мин. Иммунохроматографические тесты, основанные на капиллярном потоке, обеспечивают точные результаты. Такие системы тестирования представлены в виде специальных полосок, на которые наносится кровь либо слюна. При наличии вируса через 10 мин на тесте появляются 2 полоски:

В данном случае результат тестирования носит положительный характер. На отрицательный результат указывает появление одной контрольной полоски. Для подтверждения полученного результата проводится ИБ. На основе общий данных врач ставит диагноз, назначает лечение.

Можно выявить вирус в домашних условиях. Для этого используют специальные экспресс-наборы. OraSure Technologies1 — система, разработанная в США. Если после тестирования выявлен положительный результат, пациенту рекомендуется пройти полное обследование в медицинском центре.

Новорожденные детки, которые родились от инфицированных матерей, срочно подвергаются обследованию. С помощью серологических методик нельзя точно выявить вирус у деток в возрасте 5-18 месяцев. Но результат такого обследования важен при проведении ИБ.

Выявить инфицирование у деток можно с помощью ПЦР. ДНК вируса выявляет специалист у детей первого месяца жизни. Чтобы установить концентрацию РНК возбудителя, специалисты определяют провирус иммунодефицита.

Для исследования врач использует цельную кровь либо ее высохшее пятно. Материал помещается в пробирку с консервантом ЭДТА (пропорция 1:20). Образец необходимо хранить при температуре не выше 8°С (на протяжении 2 суток).

Не допускается замораживание материала.

Для получения образца сухой крови наносят цельную жидкость на специальную бумагу. Образец можно хранить при температуре ниже 8°С. Карточки используют в течение 8 месяцев. Новорожденного ребенка необходимо осмотреть, взяв материал на исследование, в течение следующих сроков:

  • через 48 часов после рождения;
  • в возрасте 2 месяцев после рождения;
  • через 3-6 месяцев после рождения.

Если врач выявил ген провируса ВИЧ через несколько часов после появления младенца на свет, то произошло внутриутробное инфицирование малыша. Заразиться вирусом можно и во время родов либо при грудном вскармливании.

Результаты, которые указывают на наличие ДНК вируса в 2 образцах, указывают на развитие СПИДа у ребенка. Диспансерное наблюдение не требуется, если результаты ПЦР отрицательные через 4 месяца после рождения малыша.

Если результат тестирования отрицательный, но симптоматика СПИДа присутствует, тогда рекомендуется проконсультироваться с врачом. Подобная клиника может быть спровоцирована другими заболеваниями. Единственным и 100%-ным методом диагностики вируса считается тестирование. Даже квалифицированные и опытные специалисты не могут определить вирус по проявляемой симптоматике.

Если через некоторое время результаты пациента отрицательные, то ВИЧ в организме отсутствует.

При этом не учитывается симптоматика. Но подобная клиническая картина может быть связана со СПИДофобией. В таком случае требуется помощь психолога. При необходимости ребенку или взрослому назначают соответствующее лечение.

Источник: https://nozppp.ru/vich/diagnostika-vich-infekcii.html

Медицина и здоровье
Добавить комментарий